氢溴酸右美沙芬(dextromethorphanhydrobromide，DM)是一种中枢性镇咳***，其作用机制是通过阻断咳嗽中枢反射以提高***系统咳嗽阈值而起镇咳作用，其作用与磷酸***相当，但无***的镇痛和***作用，无成瘾性，***剂量不会抑制呼吸中枢和呼吸道黏膜分泌，临床应用镇咳***，不良反应发生率低，临床应用极为安全，具有服用剂量少而镇咳效果好的优点，临床上广泛应用。本实验通过采用HPLC法测定DM在8例正常人体内的血***浓度，进而对DM糖浆和***的生物利用度作出评价。现报告如下。

     1、仪器与试***?

     ***Waters***液相色谱仪，Ubondpakphenyl色谱柱，电子分析天平，旋涡混合器，电动振荡器，离心机等；

     乙腈为色谱纯，其他***均为分析纯；DM标准品，瑞士罗氏***厂生产；DM糖浆，广东罗定制***有限公司生产；每10ml含DM15mg，DM***，广州光华***业有限公司生产，每1片含DM15mg。

     2、实验方法与结果

     2。1色谱条件Ubondpakphenyl色谱柱，流动相：10mm磷酸氢二钾缓冲液っ∶っ乙腈(55っ∶っ45，pH4。0)；检测波长：220nm；流速1。0ml/min。?

     2。2标准曲线制作与回收率测定准确称取氢溴酸右美沙芬标准品25mg，置25ml量瓶中，加蒸馏水使溶解并稀释***刻度，摇匀，配成浓度为1mg/ml的标准品溶液，再将其稀释成1***/ml，分别吸取5、10、25、50、75、100、200、300、400、500μl，加入1ml人新鲜空白血浆中，混匀，配成浓度为5~500ng/ml的右美沙芬标准血浆溶液。?

     准确称取地平泮标准品25mg，置25ml量瓶中，加甲醇溶解后加水稀释***刻度，配成浓度为1mg/ml的***标准品溶液，同样将其稀释成1***/ml，作为内标液。上述各浓度氢溴酸右美沙芬标准血浆溶液均加入100μl内标液，混匀，然后加入正己烷っ∶っ正丁醇(10っ∶っ1)混合溶剂6ml和0。1NNaOH溶液0。5ml，水平振荡20min后，离心10min，将上层有机溶液吸入试管中，加入0。1NHCL溶液200μl，水平振荡20min后，离心15min，下层酸液100μl用于HPLC进样分析，吸取20μl，按上述色谱条件分析，根据测得的美沙芬和内标色谱峰高算出峰高比。以美沙芬浓度为横坐标，峰高比为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：Y=0。0128X 0。0276，r=0。9965。?

     吸取上述各浓度经提取处理后氢溴酸右美沙芬标准血浆溶液和氢溴酸右美沙芬标准水溶液同时进样分析进行比较，求得美沙芬在血浆中的提取回收率为92。6%(n=15)。

     2。3方法重现性选择10、50、100、300ng/ml四个浓度的氢溴酸右美沙芬标准血浆溶液，在同1天内和不同天间经提取处理后进样分析，分别求出峰高比的日内变异系数和日间变异系数。四个水平的日内变异系数为1。2%~7。3%，日间变异系数为1。9%~8。3%。

     2。4实验设计与血样采集选择8例无胃肠道疾病，肝肾功能检查均正常，实验前2周未服用任何***物的健康受试者，随机分为两组，按交叉设计进行两次实验，两次实验间隔1周。实验当天两组受试者于早晨空腹进行静脉插管并采血3ml作为空白对照，然后分别单剂量口服两种美沙芬60mg，糖浆40ml，***4片，用200ml开水送服。服***后分别于0。25、0。5、0。75、1、1。5、2、3、5、8、12h采血3ml，在2500转/min离心15min，分离出血浆，置-25℃冰箱中冷冻保存***测定。服***后4h各受试者统一进食，实验期间忌烟酒，亦未服用任何其他***物。

     2。5美沙芬血***浓度测定用HPLC按内标法进行定量测定，吸取各时间点血浆样本1ml，按标准曲线制作项下所述进行提取处理后进样分析，将测得的美沙芬峰高比代入标准曲线方程，求出血浆样本中的美沙芬浓度。

     3、讨论

     3。1本实验采用***液相色谱法测定氢溴酸右美沙芬的血***浓度，灵敏度高，准确性好。?

     3。2从氢溴酸右美沙芬的血***浓度曲线图可以知道，美沙芬糖浆的人体***代动力学特性与***相似，但达峰血***浓度比***高，其生物利用度高于***。

     3。3美沙芬的人体血***浓度较低，为满足检测灵敏度要求，且美沙芬的安全性较好，本实验中试验剂量为60mg，比临床单次常用剂量(15~30mg)为高，但不超过临床1d的***用***量120mg，试验中未见有不良反应发生。